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超氧陰離子清除能力測試盒(微量法)的檢測原理

更新時間:2026-04-07      瀏覽次數(shù):69


產(chǎn)品名稱:超氧陰離子清除能力測試盒(微量法)

規(guī)格:100管/96樣

儲存條件:4

有效期:3個月

產(chǎn)品簡介:

超氧陰離子自由基作為生物體代謝過程中產(chǎn)生的一種自由基,可攻擊生物大分子,如脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、核酸和聚不飽和脂肪酸等,使其交鏈或者斷裂,引起細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的破壞,與機(jī)體衰老和病變有很密切的關(guān)系,清除超氧陰離子自由基的研究已經(jīng)得到了廣泛的關(guān)注。

檢測原理:

AP-TEMED 系統(tǒng)產(chǎn)生超氧陰離子,與鹽酸羥胺反應(yīng)生成 NO2-,NO2-與對氨基苯磺酸和 α-萘胺的作用生成紅色的偶氮化合物,在 530nm 處有特征吸收峰,樣品對超氧陰離子的清除能力與 530nm 的吸光值呈負(fù)相關(guān)。

試劑組成和配制提取液:

液體 100mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 1.5mL×1 支,4℃避光保存。

試劑二:粉劑×1 瓶,4℃避光保存。臨用前加 6mL 蒸餾水充分溶解。

試劑三:液體 7.5mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 7.5mL×1 瓶,4℃避光保存。試劑五:液體 7.5mL×1 瓶,4℃避光保存。

樣品處理:

1. 組織:按照質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g,加入 1mL提取液)加入提取液,冰浴勻漿后于 4℃,10000g 離心 10min,取上清置于冰上待測。

2. 細(xì)胞:按照細(xì)胞數(shù)量(104 個):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500萬細(xì)胞加入 1mL 提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率 300w,超聲 3 秒,間隔 7 秒,總時間 3min);然后 4℃,10000g 離心 10min,取上清置于冰上待測。3. 培養(yǎng)液或其它液體:直接檢測。

4. 粉劑藥物可配制成相同濃度,比如 1mg/mL。

注意事項:

1. 試劑一 4℃可保存 2 個月,配制好的試劑二 4℃可保存一周,建議實驗前配制,并盡快使用。

2. 樣品處理完后立即進(jìn)行測定,或者低溫保存不超過 24 小時。